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一、免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)
Coons & Coworkers 1941年通過(guò)熒光素標(biāo)記抗體,并借助熒光顯微鏡檢測(cè)可溶性肺炎雙球菌多糖抗原獲得了成功,建立了免疫熒光技術(shù)。1958年以后,異硫氰酸熒光黃(FITC)等新型熒光物質(zhì)的合成及新技術(shù)新儀器的出現(xiàn),使免疫熒光示蹤技術(shù)得到了迅速推廣。
二、免疫酶組織化學(xué)技術(shù)
自Nakane建立了免疫酶標(biāo)記技術(shù)以來(lái),這門技術(shù)發(fā)展很快,從酶標(biāo)直接法,發(fā)展到今天較為常用的PAP法、ABC法、SP三步法及PV兩步法已有20種以上,與免疫熒光相比具有不需要特殊顯微鏡、染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn)。常用的標(biāo)記酶為HRP、AKP及GO等。
PV-9000是將二抗抗體分子的單價(jià)Fab段與酶聚合在一起,與一抗結(jié)合后,直接用底物進(jìn)行顯色的方法。此方法由于簡(jiǎn)單、快速、敏感性強(qiáng)且避免了內(nèi)源性生物素所造成的背景染色,有逐漸取代其他免疫酶組織化學(xué)檢測(cè)方法的趨勢(shì)。
三、免膠體金檢測(cè)技術(shù)
是用金屬離子和金屬蛋白復(fù)合物應(yīng)用免疫組化原理檢測(cè)組織內(nèi)抗原抗體的技術(shù),常用膠體金(鐵、汞等)重金屬離子。由于膠體金容易制成各種大小的顆粒且有很高的電子密度及分辨率,又不影響抗體的活性,因此即可用于免疫組化又適于免疫電鏡技術(shù)。
文章摘自:人民衛(wèi)生出版社《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》第2版